CRISPR基因編輯一直是世界上許多研究人員的主題,因為它在研究人類遺傳疾病中的潛力很大。但不僅如此,科學家對此工具有很高的重視,因為它可以幫助治愈癡呆症和癌症等複雜和使人衰弱的疾病。
隨著在使用CRISPR基因編輯中進行更多的微調,可以有效地治愈更多的疾病。CRISPR-CAS9已用於準確替換或更改基因,但主要是在早期胚胎中進行的,並且有必要提高其準確性和易用性。考慮到這一點,加利福尼亞大學伯克利分校的研究人員開發了一種新方法CRISPR-EZ(CRISPR核糖核蛋白的膠蛋白電穿孔),這將使基因編輯更容易。
“我認為這項技術可以大大減少這種努力的技術障礙,並使人們更多地專注於科學,而不是被基因工程小鼠的過程所消耗,”說加州大學伯克利分子和細胞生物學的首席研究員兼副教授林·赫(Lin He)。
合子的電穿孔與體外受精
如今,基因編輯研究在體外受精中使用了轉基因小鼠。向雌性小鼠注入激素以準備交配。然後,將向受精卵注入RNA分子,以在其分裂之前為引導RNA和Cas9蛋白進行編碼。然後將胚胎植入鼠標。
此方法是昂貴的,耗時的,成功率較低。林說,這些小鼠的成功分娩百分比僅為10%至15%,這需要收集100多個胚胎以創建可用於基因編輯的鼠標。
為了測試他們的工具,研究人員在實驗中使用了CRISPR-EZ。電穿孔通過電力震動形成胚胎孔。這些孔將作為基因編輯分子的入口點。通過這種方法,研究人員能夠以88%的精度成功改變目標基因,並在大約30%至50%的受精卵中成功產生活產,這主要是由於胚胎的生存能力增強。
由於成功率很高,該工具也可以用作確定導向RNA的可取性的量規。
他說:“如果您的crispr-ez不起作用,那不是因為交付;這可能是因為您的指南RNA設計需要改進。”
癌症研究實驗室主任兼分子和細胞生物學教授Russell Vance說:“隨著CRISPR和CRISPR-EZ等改進,成本和時間都至少下降了十倍。”
這學習發表在生物化學雜誌5月5日。